Reactivos extracción ADN tiras Bento DS-KIT. Caja 100 ensayos

Descripción

El kit de extracción de ADN Dipstick es una forma muy rápida de extraer ADN y eliminar contaminantes. La muestra resultante se puede utilizar para ensayos de PCR, secuenciación y código de barras de ADN. El método fue desarrollado y publicado por Zou et al. (2017) .

Con un coste reducido por muestra, este método ofrece una alternativa asequible y fiable a los métodos de extracción en columna para muestras con muy bajo contenido de ADN que requieren la eliminación de inhibidores. Este método no es adecuado para protocolos que requieren la extracción total de ADN genómico. 

Composición del reactivo

Tampón de extracción : 20 mM Tris-HCl, 25 mM NaCl, 2,5 mM EDTA, 0,05% SDS, 2% PVP-40, pH 8.

Tampón de lavado : Tris-HCl 10 mM, pH 8

Varillas medidoras : filtro a base de celulosa, cera

Almacenamiento y estabilidad

Sin abrir: Conservar a temperatura ambiente (18–25 °C) durante un máximo de 1 año.

Una vez abierto: Conservar a temperatura ambiente (18–25 °C) durante un máximo de un año. El tampón de extracción y el tampón de lavado también pueden refrigerarse (a unos 4 °C) o congelarse (–20 °C) para reducir el riesgo de contaminación microbiana o para un almacenamiento prolongado. Si el tampón de extracción se refrigera o congela, debe calentarse en un recipiente con agua muy caliente para redisolver cualquier detergente precipitado.

Condiciones de envío

Se envía a temperatura ambiente.

Protocolo de inicio rápido

Use guantes, utilice equipos estériles y siga prácticas de trabajo estériles.

1. Pipetee de 100 a 200 µL de tampón de extracción en un tubo de 1,5 mL. 
2. Añada una muestra de tejido de 1-2 mm³ ^al tubo utilizando instrumentos estériles. 
3. Triturar la muestra con un mortero estéril durante 10 segundos o más, hasta que el tejido esté prácticamente pulverizado.
4. Añada de 300 a 400 µL de tampón de extracción hasta alcanzar un volumen total de 500 µL y cierre el tubo.
5. Pipetee 1 ml de tampón de lavado en un tubo vacío de 1,5 ml y cierre la tapa. 
6. Si va a utilizar la muestra inmediatamente, prepare la mezcla de PCR en tubos de 0,2 ml.
7. Sumerja el extremo descubierto (la zona de unión) de la tira reactiva en el tampón de extracción tres veces para capturar el ADN. Compruebe que la zona de unión esté completamente empapada.
8. Sumerja suavemente la zona de unión de la tira reactiva en el tubo de tampón de lavado cinco veces.
9. Retire la tira reactiva del líquido y límpiela suavemente contra el borde del tubo para eliminar cualquier gota de tampón de lavado. Deseche el tubo con el tampón de lavado. La zona de unión de la tira reactiva contendrá el ADN lavado.
10. Sumerge la tira reactiva en la mezcla de PCR hasta 15 veces para liberar el ADN.
    Consejo : Empuja la tira reactiva hasta el fondo del tubo hasta que se doble. Esto facilita el paso del líquido a través del papel y aumenta la cantidad de ADN liberado. 
11. Limpie la tira reactiva en el borde del tubo de 0,2 ml para eliminar cualquier gota de la mezcla de PCR. La reacción de PCR ya está lista para comenzar. 
12. Como alternativa, almacene el ADN en tampón TE para utilizar la muestra posteriormente. Para liberar el ADN, sumerja la tira reactiva en un tubo de 1,5 ml de tampón TE y guárdelo a 4 °C a corto plazo o congélelo a –20 °C para un almacenamiento a largo plazo.